常用作緩沖溶液的酸類(lèi)由弱酸及其共軛酸鹽組合成的溶液具有緩沖作用。生化實(shí)驗(yàn)室常用的緩沖系主要有磷酸、檸檬酸、碳酸、醋酸、酸、Tris(三羥甲基氨基甲烷)等系統(tǒng)。
生化實(shí)驗(yàn)或研究工作中要慎重地選擇緩沖體系，因?yàn)橛袝r(shí)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素并不是緩沖液的pH值，而是緩沖液中的某種離子。如硼酸鹽、檸檬酸鹽、磷酸鹽和三羥甲基甲烷等緩沖劑都可能產(chǎn)生不需要的化學(xué)反應(yīng)。
緩沖溶液的配制
只要知道緩沖對(duì)的PH值，和要配制的緩沖液的pH值(及要求的緩沖液總濃度)，就能按公式計(jì)算[鹽]和[酸]的量。這個(gè)算法涉及對(duì)數(shù)換算，較麻煩，前人為減少后人的計(jì)算麻煩，已為我們總結(jié)出pH值與緩沖液對(duì)離子用量的關(guān)系并列出了表格。只要我們知道要配制的緩沖液的pH，經(jīng)查表便可計(jì)算出所用緩沖劑的比例和用量。例如配制500nm pH5.8濃度為0.1M磷酸緩沖液。
經(jīng)查表知pH5.8濃度為0.2M Na2HPO48.0毫升(1M=1 mol/L)，而0.2M Na2HPO492.0毫升。依此可推論出配制100ml 0.1M的磷酸緩沖液需要0.1M Na2HPO48.0毫升，而0.1M Na2HPO4需要92.0毫升。
計(jì)算好后，按計(jì)算結(jié)果準(zhǔn)確稱(chēng)好固態(tài)化學(xué)成分，放于燒杯中，加少量蒸餾水溶解，轉(zhuǎn)移入50ml容量瓶，加蒸餾水至刻度，搖勻，就能得到所需的緩沖液。
各種緩沖溶液的配制，均按表格按比例混合，某些試劑，必須標(biāo)定配成準(zhǔn)確濃度才能進(jìn)行，如醋酸、氫氧化鈉等。另外，所有緩沖溶劑的配制計(jì)量都能從以上的算式準(zhǔn)確獲得
緩沖溶液的組成
緩沖體系由
1、弱酸和它的鹽(如HAc---NaAc)
2、弱堿和它的鹽(NH3·H2O---NH4Cl)
3、多元弱酸的酸式鹽及其對(duì)應(yīng)的次級(jí)鹽(如NaH2PO4---Na2HPO4)的水溶液組成。
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