聚合物基質(zhì)色譜柱是一種分離分析手段,分離是核心,因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。對色譜柱的要求是柱效高、選擇性好,分析速度快等。市售的用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質(zhì)的鍵合相、氧化鋁、有機(jī)聚合物微球(包括離子交換樹脂)、多孔碳等,其粒度一般為3,5,7,10um等,柱效理論值可達(dá)5-16萬/米。對于一般的分析只需5000塔板數(shù)的柱效;對于同系物分析,只要500即可;對于較難分離物質(zhì)對則可采用高達(dá)2萬的柱子,因此一般10-30cm左右的柱長就能滿足復(fù)雜混合物分析的需要。
聚合物基質(zhì)色譜柱是在一根玻璃管或金屬管中進(jìn)行的色譜技術(shù),將吸附劑填充到管中而使之成為柱狀,這樣的管狀柱稱為吸附色譜柱。使用吸附色譜柱分離混合物的方法,稱為吸附柱色譜。這種方法可以用來分離大多數(shù)有機(jī)化合物,尤其適合于復(fù)雜的天然產(chǎn)物的分離。分離容量從幾毫克到百毫克級,所以,適用于分離和精制較大量的樣品。
在吸附柱色譜中,吸附劑是固定相,洗脫劑是流動相,相當(dāng)于薄層色譜中的展開劑。吸附劑的基本原理與吸附薄層色譜相同,也是基于各組分與吸附劑間存在的吸附強(qiáng)弱差異,通過使之在柱色譜上反復(fù)進(jìn)行吸附、解吸、再吸附、再解吸的過程而完成的。所不同的是,在進(jìn)行柱色譜的過程中,混合樣品一般是加在色譜柱的頂端,流動相從色譜柱頂端流經(jīng)色譜柱,并不斷地從柱中流出。由于混合樣中的各組分與吸附劑的吸附作用強(qiáng)弱不同,因此各組分隨流動相在柱中的移動速度也不同,最終導(dǎo)致各組分按順序從色譜柱中流出。如果分步接收流出的洗脫液,便可達(dá)到混合物分離的目的。一般與吸附劑作用較弱的成分先流出,與吸附作用較強(qiáng)的成分后流出。
正確的使用聚合物基質(zhì)色譜柱是極其重要的,并且對液相分析非常有幫助的。接下來的文章是一些使用、清洗和保存液相聚合物基質(zhì)色譜柱的指導(dǎo)。這些指導(dǎo)根據(jù)兩方面來分的,一方面是根據(jù)聚合物基質(zhì)色譜柱的基質(zhì)(硅膠,聚合物或者其他),另—方面是表面鍵和的化學(xué)固定相。
聚合物基質(zhì)色譜柱采用純聚合物基材,因此具有的耐緘性(PH范圍2-13),適用于帶有芳香環(huán)以及不飽和化合物的分離/純化。此類柱提供了廣范的溶劑的選擇,pH范圍可叢1-13。聚合物C18從親水的甲基丙烯酸酯鍵合C18官能團(tuán),利用親水的聚甲基丙烯酸酯載體鍵合ODS性能相似于硅膠鍵合ODS甲基丙烯酸酯在聚合前就用C18官能團(tuán)化,因此有較大的重現(xiàn)性沒有硅醇基和金屬雜質(zhì),有用的顆粒度為6,10,50u在pH1-13間穩(wěn)定。和所有的標(biāo)準(zhǔn)的反相溶劑都相容。