二元有兩個(gè)泵,高壓混合,對(duì)氣泡不敏感 四元只一個(gè)泵,低壓混合,對(duì)氣泡較敏感,須配在線脫氣機(jī) 二元高壓混合和四元低壓混合的一個(gè)重大區(qū)別就是前者進(jìn)入后立即進(jìn)行混合而后者是進(jìn)泵以后慢慢混合,有的還要過一混合器,混合不但置后,而且效果明顯不如前者。 高壓梯度現(xiàn)在很多都可以用一個(gè)泵來控制另一個(gè)泵,而低壓梯度往往需要一個(gè)梯度控制系統(tǒng)。 幾元泵,分為高壓混合和低壓混合,高壓混合又叫泵后混合,hplc幾元泵就是幾個(gè)泵;低壓混合又叫泵前混合,其實(shí)就是一個(gè)泵,幾 元就是安裝幾路電磁閥 泵,可組裝成為二元高壓梯度與四元低壓梯度兩種系統(tǒng),兩者區(qū)別如下: 二元高壓梯度: 配置:雙泵+在線混合器 工作方式:雙泵并聯(lián),可同時(shí)有兩個(gè)流動(dòng)相,按照預(yù)先設(shè)定的配比進(jìn)入,再高壓下進(jìn)行混合,混合配比更準(zhǔn)確,不易產(chǎn)生氣泡,不用為了轉(zhuǎn)換流動(dòng)相而反復(fù)清洗,提高了工作效率。同時(shí)可以做梯度洗脫,當(dāng)待測(cè)樣品成分復(fù)雜,用一個(gè)固定的流動(dòng)相配比無法將樣品中成分分開時(shí),就需要用到梯度洗脫,在同一個(gè)分析過程中由儀器自動(dòng)改變流動(dòng)相配比,將樣品中前次無法分離的物質(zhì)進(jìn)行洗脫,在同一譜圖中得到分開的峰的效果。有助于提高分析準(zhǔn)確性,避免遺漏重要物質(zhì)的檢測(cè)。 hplc四元低壓梯度: 配置:?jiǎn)伪?低壓梯度閥+在線脫氣機(jī)+混合器 工作方式:最多可同時(shí)有四個(gè)流動(dòng)相進(jìn)入流路,按照預(yù)先設(shè)定的配比進(jìn)行混合,由于在常壓下混合所以較易產(chǎn)生氣泡,因此必須配備在線脫氣機(jī),可消除氣泡影響。可以做梯度洗脫,在儀器上進(jìn)行設(shè)定之后,在同一樣品分析工程中,相隔一段時(shí)間后,按照用戶設(shè)定的配比自行改變流動(dòng)相配比,將樣品中所有組分分離開來,有助于提高分析準(zhǔn)確性。 做簡(jiǎn)單的分析,一般性的化合物用二元的系統(tǒng)就很好,分析如果做蛋白類,多肽等半制備或梯度洗脫還是四元系統(tǒng)方便,但需配在線脫氣機(jī).通過這些年我的經(jīng)驗(yàn),我認(rèn)為還是四元好用,如果資金沒問題的話. 所謂幾元,指的是能同時(shí)控制流路的多少.一元,二元,四元都有低壓泵.如Waters515--一元低壓,waters1515--二元低壓,HP1100--四元低壓。高壓泵多為二元,再往上做成本太高,實(shí)用性也不強(qiáng)。因?yàn)槎邏阂话憔湍軡M足廣大客戶的使用了,如watersUPLC.低壓泵通常只有一個(gè)泵,二元以上可做梯度洗脫,是先混合,經(jīng)在線脫氣機(jī)脫氣后進(jìn)泵,而高壓泵則是有幾元?jiǎng)t有幾個(gè)泵,在泵后混合,通過流速控制配比關(guān)系,不易產(chǎn)生氣泡,但仍配有脫氣機(jī)。 二元高壓梯度流量控制精度更高,混合室在泵后,高壓下混合效率也高很多、梯度組成精確;四元低壓梯度系統(tǒng)采用單泵加梯度比例閥來實(shí)現(xiàn),因?yàn)楸壤y是在泵前的,并且各流路的溶劑在比例閥里就混合在一起了,所以是泵前、低壓混合。一般地,對(duì)于常規(guī)分析來說,四元低壓梯度也可以滿足需要;如果分析樣品成份復(fù)雜、對(duì)重現(xiàn)性要求較高,或者需要在低流量下進(jìn)行梯度分析,還是選擇高壓梯度好一些。 液相色譜從性能上比較:二元高壓肯定由于四元低壓。二元高壓的混合比例是通過改變泵的流速來獲得的,通常泵的流速都是很準(zhǔn)的,所以混合的精度也是很高的。四元低壓梯度的混合比例是通過控制不同流路的電磁閥的開閉時(shí)間長(zhǎng)短來控制的,理論上混合的比例也是準(zhǔn)確的,但是實(shí)際上電磁閥的開閉會(huì)有一個(gè)延遲,無論它動(dòng)作多么快,總還是需要一點(diǎn)時(shí)間的。比如A路和B路各50%混合,在單位時(shí)間內(nèi),A路和B路的電磁閥各開通50%的時(shí)間,這時(shí)問題不大,電磁閥的延遲影響可以通過調(diào)整補(bǔ)償系數(shù)來盡量彌補(bǔ)。但是如果一點(diǎn)的情況,A路99%,B路1%,這種情況下單位時(shí)間內(nèi),A路的電磁閥開通99%的時(shí)間,B路只占 1%,時(shí)間是很短的,這時(shí)B路電磁閥的延遲就影響很大了,甚至可能延遲的時(shí)間比工作的時(shí)間還要長(zhǎng),其結(jié)果可想而知。而高壓梯度就不會(huì)存在這種問題了。 從價(jià)格上比較:一般情況下,二元高壓梯度的價(jià)格會(huì)比四元低壓梯度高很多的(如果其他配置都相同的話)。 二元泵通常是指高壓梯度,四元泵指低壓梯度. 高壓是指兩個(gè)泵分別送液在泵后的混合室內(nèi)混合.而低壓是依靠電磁閥的切換使泵分段輸送不同流動(dòng)相,同樣在泵后的混合室內(nèi)混合.主要區(qū)別在于低壓混合是容易產(chǎn)生氣泡.高壓則不容易產(chǎn)生氣泡.低壓應(yīng)注意清洗,尤其使用緩沖鹽時(shí),避免將電磁閥送液管路堵住.分析
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