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1、樣品的前處理：

a、使用活動相溶解樣品。

b、使用予處理柱除往樣品中的強(qiáng)極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì)。

c、使用0.45μm的過濾膜過濾除往微粒雜質(zhì)。

2、活動相的配制：

液相色譜是樣品組分在柱填料與活動相之間質(zhì)量交換而達(dá)到分離的目的，因此要求活動相具備以下的特點：

a、活動相對樣品具有一定的溶解能力，保證樣品組分不會沉淀在柱中（或長時間保存在柱中）。

b、活動相具有一定惰性，與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)（特殊情況除外）。

c、活動相的黏度要盡量小，以便在使用較長的分析柱時能得到好的分離效果；同時降低柱壓降，延長液體泵的使用壽命（可運用進(jìn)步溫度的方法降低活動相的黏度）。

d、活動相的物化性質(zhì)要與使用的檢測器相適應(yīng)。如使用UV檢測器，使用對紫外吸收較低的溶劑配制。

e、活動相沸點不要太低，否則輕易產(chǎn)生氣泡，導(dǎo)致實驗無法進(jìn)行。

f、在活動相配制好后，一定要進(jìn)行脫氣。除往溶解在活動相中的微量氣體既有利于檢測，還可以防止活動相中的微量氧與樣品發(fā)生作用。

3、活動相流速的選擇：

   因柱效是柱中活動相線性流速的函數(shù)，使用不同的流速可得到不同的柱效。對于一根特定的色譜柱，要追求柱效，使用流速。對內(nèi)徑為4.6mm的色譜柱，流速一般選擇1ml／min，對于內(nèi)徑為4.0mm柱，流速0.8ml／min為佳。

   當(dāng)選用流速時，分析時間可能延長?？刹捎酶淖兓顒酉嗟南礈鞆?qiáng)度的方法以縮短分析時間（如使用反相柱時，可適當(dāng)增加甲醇或乙腈的含量）。