HILIC色譜柱為色譜工作者在日常LC方法開發(fā)工作中考察不同ACQUITY UPLC色譜柱的分離選擇性而設(shè)計。我們設(shè)計ACQUITY UPLC HSS C18 色譜柱用于在低pH流動相條件下分離堿性化合物和非堿性化合物組成的混合物，同現(xiàn)代高C18覆蓋率和端基封尾的C18柱相比，這款色譜柱能夠提供不同的分離選擇性。對柱子長短的選擇：由于分辨率與柱長的平方根成正比。柱子長，則提高分辨率。一般來說：15m的短柱用于快速分離較簡單的樣品，也適于快速成分掃描分析；30m的HILIC色譜柱是zui常用的柱長，大多數(shù)分析在此長度的柱子上完成；50m、60m或更長的氣相HILIC色譜柱/氣象色譜柱用于分離比較復(fù)雜的樣品。
一般，初次使用氣相色譜儀的朋友對色譜柱不知怎樣合理配置氣相色譜柱/氣象HILIC色譜柱，總希望氣相色譜柱/氣象色譜柱越多越好，盲目購置許多柱子或固定液、擔(dān)體等，結(jié)果有許多閑置造成浪費。專家就此向大家推薦一些值得考慮的經(jīng)驗。
HILIC色譜柱從多年的經(jīng)驗來談起，一般準(zhǔn)備幾個柱子就基本可以解決各類氣相色譜分析工作的要求，可優(yōu)先選擇固定液分別為SE-30（或者OV-101）、OV-17、PEG-20M、DEGS、FFAP的柱子各一個。HILIC色譜柱對于填充柱，擔(dān)體可選白色擔(dān)體、紅色擔(dān)體（包括未酸洗、酸洗、硅烷化）、GDX系列（或者Porapak系列）三種，基本可以解決工作中絕大部分項目。
對于口徑的選擇：HILIC色譜柱柱徑直接影響柱子的效率、保留特性和樣品容量。小口徑柱比大口徑柱有更高柱效，但柱容量更小。
0.25mm：具有較高的柱效，柱容量較低。分離復(fù)雜樣品較好。
0.32mm：柱效稍低于0.25mm的HILIC色譜柱，但柱容量約高60%。
0.53mm：具有類似于填充柱的柱容量，可用于分流進樣，也可用于不分流進樣，當(dāng)柱容量是主要考慮因素時（如痕量分析），選擇大口徑毛細管柱較為合適。專家認為，對于普通用戶，可選30米或50米長的毛細管，口徑選0.32mm較為便利。
我們是如何設(shè)計HILIC色譜柱達到這樣的效果呢？專門研究色譜填料的科學(xué)家們在HSS硅膠基體上采用三鍵鍵合技術(shù)，鍵合了中等配體密度（約1.6 μmol/m2）的C18配體，而且沒有對游離硅羥基進行端基封尾。一般來說，同現(xiàn)代的高C18覆蓋率端基封尾的C18HILIC色譜柱相比，較高活性的硅羥基將增強堿性化合物的保留，而中等C18配體密度能夠?qū)Ψ菈A性化合物產(chǎn)生較弱（或相當(dāng)）的保留。從色譜理論分析，HILIC色譜柱這種的鍵合和端基封尾組合將成為復(fù)雜UPLC分離方法開發(fā)工作中一個實用且方便的工具。
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