GPC色譜柱用于分離水溶性聚合物,例如,低聚糖、多糖以及陽離子、陰離子、中性聚合物等。這種高分辨率的GPC色譜柱具有如下的優(yōu)點(diǎn):pH范圍寬(1-12)、允許高有機(jī)溶劑含量的流動相(流動相中有機(jī)溶劑含量可以達(dá)到20%)、適用的流動相范圍廣。
利用GPC色譜柱對結(jié)構(gòu)異構(gòu)體進(jìn)行分離:
GPC色譜柱長期以來被認(rèn)為是很難對分子量相近的化合物或結(jié)構(gòu)異構(gòu)體進(jìn)行分離的。但是通過循環(huán)的方法可以輕松的利用GPC色譜柱對以上涉及到的化合物進(jìn)行分離。
由于H系列色譜柱一般使用氯仿作為流動相,因此對于疏水性樣品溶解性比較好。同時在利用循環(huán)分離過程中,溶劑的消耗量只有逆相色譜的二十分之一左右。
對于結(jié)構(gòu)異構(gòu)體進(jìn)行分離,我們一般需要10到20個循環(huán)。而8、9產(chǎn)物由于在硅膠體系中展開非常困難,是以往很難進(jìn)行分離的產(chǎn)物。
這類產(chǎn)物,即便是在GC上也很難利用SE-30進(jìn)行分離。但是使用GPC色譜柱,單次上量300mg,只需要10次循環(huán)就能夠分離開了。
GPC色譜柱再生:
反方向沖洗色譜柱,沖洗期間不要連接到檢測器,采用二分之一的推薦流速進(jìn)行沖洗(讓壓力保持在推薦zui大值以下)。
大多數(shù)GPC色譜柱填料是PS-DVB,選擇一種可以溶解色譜柱中污染物的溶劑。沖洗之前需要檢查溶劑兼容性。對于粘度較大的溶劑,必須采用較低的流速,觀察壓力變化不要超過色譜柱上限。
在某些情況下,根據(jù)污染物情況,清洗的時候可以加入能與有機(jī)溶劑相溶的酸性物(甲酸或乙酸)或堿性物(三胺)(檢查pH范圍)。
如果更多的疏水性污染物被保留,推薦提高溫度并使用適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑。您需要再一次核對色譜柱允許的zui大溫度范圍。
如果仔細(xì)地進(jìn)行清洗,GPC色譜柱不會因?yàn)槿軇┺D(zhuǎn)換而導(dǎo)致性能下降。詳細(xì)操作參考說明書。