凝膠色譜柱是以剛性的球型硅膠為基質(zhì),在其表面通過(guò)共價(jià)鍵化學(xué)鍵合親水基團(tuán)而成。凝膠色譜柱的填料具有高性能尺寸排阻色譜所必需的性能,即低吸附性和良好的孔徑分布;其pH適用范圍為2.5-7.5,可以使用與水互溶的有機(jī)溶劑,如乙腈、丙酮、甲醇或乙醇等。凝膠色譜柱適合用于分析分離蛋白質(zhì)和多肽類(lèi)樣品。
凝膠色譜柱其充填介質(zhì)化學(xué)穩(wěn)定性好,不易發(fā)生由于官能基脫落而導(dǎo)致樣品組分洗脫位置變化的現(xiàn)象。盡管如此,由于柱子的反復(fù)使用,在長(zhǎng)時(shí)間使用后,樣品組分的洗脫情況還是會(huì)發(fā)生改變的。其原因與樣品中極微量的附吸物在柱中的蓄積有關(guān)。特別由于生物樣品組分復(fù)雜,這種吸附現(xiàn)象時(shí)有發(fā)生。(非特異性吸附)當(dāng)觀察到這樣的現(xiàn)象后,應(yīng)使用合適的溶劑將蓄積的吸附物質(zhì)去除,以恢復(fù)柱子的性能。
淺析凝膠色譜柱的儲(chǔ)存方法:
1.將凝膠柱用蒸餾水沖凈后充上0.02%-0.05%的疊氮鈉水溶液封存,或三氯丁醇(0.015%) 苯基汞代鹽(0.001-0.01%)將色譜柱封閉后低溫保存(溫度在5℃左右)在冰箱。
2.再次使用時(shí),用蒸餾水將保護(hù)溶液沖洗掉即可使用。
3.如果第二天還要使用也要從系統(tǒng)中取下,將柱封閉后存于4~8度的冰箱中冷藏。
凝膠色譜柱特點(diǎn):
1. 凝膠色譜柱具有強(qiáng)大的適用性和可靠性,其主要產(chǎn)品有SW、PW等系列;
2. SL 及PL相對(duì)SW和PW而言,具有更好的峰分辨率;而SW和PW柱具有較大樣品的承載能力;
3. 凝膠色譜柱適合于分析單分散性的生物大分子,如蛋白、肽等;
凝膠色譜柱更加適合于如多糖和合成聚合物等多分散性的分析分離。
凝膠色譜柱的填料是親水而剛性,多孔球型,化學(xué)和機(jī)械性能都非常優(yōu)異的聚合物。適用于以凝膠色譜的模式分析分離蛋白質(zhì)、多肽、多糖、寡糖、DNA、RNA、水溶性的有機(jī)聚合物和其他水溶性大分子樣品等。
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