Anti-TCHP抗體,抑癌蛋白TCHP抗體
規(guī)格:100ul,200ul,1mg
宿主:兔,鼠,羊
Ig類型:IgG
克隆類型:?jiǎn)慰寺?/span>/多克隆
標(biāo)記物:無標(biāo)記物.
需要標(biāo)記抗體,可咨詢客服訂購。相關(guān)標(biāo)記抗體:HRP標(biāo)記抗體,Biotin標(biāo)記抗體,Gold標(biāo)記抗體,RBITC標(biāo)記抗體,AP標(biāo)記抗體,FITC標(biāo)記抗體,Cy3標(biāo)記抗體,Cy5標(biāo)記抗體,Cy5.5標(biāo)記抗體,Cy7標(biāo)記抗體,PE標(biāo)記抗體,PE-Cy3標(biāo)記抗體,PE-Cy5標(biāo)記抗體,PE-Cy5.5標(biāo)記抗體,PE-Cy7標(biāo)記抗體,APC標(biāo)記抗體,Alexa Fluor 350標(biāo)記抗體,Alexa Fluor 488標(biāo)記抗體,Alexa Fluor 555標(biāo)記抗體,Alexa Fluor 647標(biāo)記抗體
濃度 :1mg/ml
純化方式:抗原特異性親和純化
緩沖液成分:0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
應(yīng)用: WB;IHC-P、IHC-F; ICC; IP;IF;ELISA。如果抗體需用于流式細(xì)胞術(shù),請(qǐng)參見流式抗體。具體適用的實(shí)驗(yàn)和針對(duì)的物種請(qǐng)來電或99咨詢。公司提供Elisa實(shí)驗(yàn)配對(duì)抗體抗原,需要請(qǐng)電詢或99咨詢。
產(chǎn)品稀釋比例:ELISA=1:1000,Western blotting=1:500,IF=1:100-50,IHC-P=1:100-500,IHC-F=1:100-500,Immunohistocry=1:100-500
Optimal working dilutions must be determined by end user.
保質(zhì)期:1年
儲(chǔ)存溫度:-20℃(避免反復(fù)凍融)
Anti-TCHP抗體,抑癌蛋白TCHP抗體
蛋白質(zhì)樣品獲得:細(xì)菌誘導(dǎo)表達(dá)后,可通過電泳上樣緩沖液直接裂解細(xì)胞,真核細(xì)胞加勻漿緩沖液,機(jī)械或超聲波室溫勻漿0.5-1min。然后4℃,13,000g離心15min。取上清液作為樣品。(二)電泳:制備電泳凝膠,進(jìn)行SDS-PAGE。
1、電泳結(jié)束后將膠條割至合適大小,用轉(zhuǎn)膜緩沖液平衡,5min×3次。
2、膜處理:預(yù)先裁好與膠條同樣大小的濾紙和NC膜,浸入轉(zhuǎn)膜緩沖液中10min。
3、轉(zhuǎn)膜:轉(zhuǎn)膜裝置從下依次按陽極碳板、24層濾紙、NC膜、凝膠、24層濾紙、陰極碳板的順序放好,濾紙、凝膠、NC膜精確對(duì)齊,每一步去除氣泡,上壓 500g重物,將碳板上多余的液體吸干。接通電源,恒流1mA/cm2,轉(zhuǎn)移1.5hr。轉(zhuǎn)移結(jié)束后,斷開電源將膜取出,割取待測(cè)膜條做免疫印跡。將有蛋白標(biāo)準(zhǔn)的條帶染色,放入膜染色液中50s后,在50%甲醇中多次脫色,至背景清晰,然后用雙蒸水洗,風(fēng)干夾于兩層濾紙中保存,留與顯色結(jié)果作對(duì)比。
免疫反應(yīng):
1、用0.01M PBS洗膜,5min ×3次。
2、加入包被液,平穩(wěn)搖動(dòng),室溫2hr。
3、棄包被液,用0.01M PBS洗膜,5min×3次。
4、加入一抗(按合適稀釋比例用0.01M PBS稀釋,液體必須覆蓋膜的全部),4℃ 放置12hr以上。陰性對(duì)照,以1%BSA取代一抗,其余步驟與實(shí)驗(yàn)組相同。
5、棄一抗和1%BSA,用0.01M PBS分別洗膜,5min×4次。
6、加入辣根過氧化物酶偶聯(lián)的二抗(按合適稀釋比例用0.01M PBS稀釋),平穩(wěn)搖動(dòng),室溫2hr。
7、棄二抗,用0.01M PBS洗膜,5min×4次。
8、加入顯色液,避光顯色至出現(xiàn)條帶時(shí)放入雙蒸水中終止反應(yīng)。
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