Anti-UEVLD抗體，泛素結(jié)合酶E2樣蛋白抗體
規(guī)格：100ul，200ul，1mg
宿主：兔，鼠，羊
Ig類型：IgG
克隆類型：單克隆/多克隆
標(biāo)記物：無標(biāo)記物.
需要標(biāo)記抗體，可咨詢客服訂購。相關(guān)標(biāo)記抗體：HRP標(biāo)記抗體,Biotin標(biāo)記抗體,Gold標(biāo)記抗體,RBITC標(biāo)記抗體,AP標(biāo)記抗體,FITC標(biāo)記抗體,Cy3標(biāo)記抗體,Cy5標(biāo)記抗體,Cy5.5標(biāo)記抗體,Cy7標(biāo)記抗體,PE標(biāo)記抗體,PE-Cy3標(biāo)記抗體,PE-Cy5標(biāo)記抗體,PE-Cy5.5標(biāo)記抗體,PE-Cy7標(biāo)記抗體,APC標(biāo)記抗體,Alexa Fluor 350標(biāo)記抗體,Alexa Fluor 488標(biāo)記抗體,Alexa Fluor 555標(biāo)記抗體,Alexa Fluor 647標(biāo)記抗體
濃度 ：1mg/ml
純化方式：抗原特異性親和純化
緩沖液成分：0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
應(yīng)用： WB;IHC-P、IHC-F; ICC; IP;IF;ELISA。如果抗體需用于流式細(xì)胞術(shù)，請(qǐng)參見流式抗體。具體適用的實(shí)驗(yàn)和針對(duì)的物種請(qǐng)來電或99咨詢。公司提供Elisa實(shí)驗(yàn)配對(duì)抗體抗原，需要請(qǐng)電詢或99咨詢。
產(chǎn)品稀釋比例：ELISA=1:1000，Western blotting=1:500，IF=1:100-50，IHC-P=1:100-500，IHC-F=1:100-500，Immunohistocry=1:100-500
Optimal working dilutions must be determined by end user.
保質(zhì)期：1年
儲(chǔ)存溫度：-20℃（避免反復(fù)凍融）
Anti-UEVLD抗體，泛素結(jié)合酶E2樣蛋白抗體
免疫動(dòng)物 免疫動(dòng)物是用目的抗原免疫小鼠，使小鼠產(chǎn)生致敏B淋巴細(xì)胞的 過程。 一般選用6-8周齡雌性Balb/c小鼠，按照預(yù)先制定的免疫方案進(jìn)行免疫注射。 抗原通過血液循環(huán)或淋巴循環(huán)進(jìn)入外周免疫器官，刺激相應(yīng)B淋巴細(xì)胞克隆，使其活化、增殖，并分化成為致敏B淋巴細(xì)胞.細(xì)胞融合 采用眼球摘除放血法處死小鼠，無菌操作取出脾臟，在平皿內(nèi)擠壓研磨，制備脾細(xì)胞懸液。 將準(zhǔn)備好的同系骨髓瘤細(xì)胞與小鼠脾細(xì)胞按一定比例混合，并加入促融合劑聚乙二醇。在聚乙二醇作用下，各種淋巴細(xì)胞可與骨髓瘤細(xì)胞發(fā)生融合，形成雜交瘤細(xì)胞。
選擇性培養(yǎng) 選擇性培養(yǎng)的目的是篩選融合的雜交瘤細(xì)胞，一般采用HAT選擇性培養(yǎng)基。在HAT培養(yǎng)基中，未融合的骨髓瘤細(xì)胞因缺乏次--磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶，不能利用補(bǔ)救途徑合成DNA而死亡。 未融合的淋巴細(xì)胞雖具有次--磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶，但其本身不能在體外存活也逐漸死亡。 只有融合的雜交瘤細(xì)胞由于從脾細(xì)胞獲得了次磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶，并具有骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖的特性，因此能在HAT培養(yǎng)基中存活和增殖。
雜交瘤陽性克隆的篩選與克隆化 在HAT培養(yǎng)基中生長的雜交瘤細(xì)胞，只有少數(shù)是分泌預(yù)定特異性單克隆抗體的細(xì)胞，因此，必須進(jìn)行篩選和克隆化。通常采用有限稀釋法進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞的克隆化培養(yǎng)。采用靈敏、快速、特異的免疫學(xué)方法，篩選出能產(chǎn)生所需單克隆抗體的陽性雜交瘤細(xì)胞，并進(jìn)行克隆擴(kuò)增。經(jīng)過全面鑒定其所分泌單克隆抗體的免疫球蛋白類型、亞類、特異性、親和力、識(shí)別抗原的表位及其分子量后，及時(shí)進(jìn)行凍存。
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